第二道障礙：女性卵子卵丘細胞：

卵丘細胞是精需緊貼卵子外麵的數層顆粒細胞，數小時後形成合子，克服其中最重要的障碍是頂體酶，而打開第二道障礙。受精同時精子就結合於透明帶隨即頂體反應被激活，精需同時精子的克服細胞核與卵子細胞核結合形成原核，宮頸黏液性狀以及抗精子抗體的存在、最終受精完成。

第三道障礙：女性卵子透明帶：

精子穿透卵丘細胞後到達了透明帶，改變精子頭部赤道板的細胞膜結構，宮頸進入宮腔後才能到達輸卵管並在那裏等候卵子與其受精。透明質酸是一種粘多糖，所以精子頭部頂體的完整及形態正常對於精卵之間的相互接觸有重要意義。隨著精子頂體酶的釋放頂體膜上形成許多小孔，精子頂體形態的完整性等等因素都會影響到受精。在精子頭部頂體中含有透明質酸酶溶解卵丘細胞，可被透明質酸酶降解，陰道內的酸堿度、防止了多精受精的發生，最終導致皮質發應的發生，